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芽殖酵母細(xì)胞周期過程不同時期的定量觀測

張志溫; 李方廷 北京大學(xué)物理學(xué)院; 北京大學(xué)定量生物學(xué)中心; 北京100871
  • 芽殖酵母
  • 單細(xì)胞觀測
  • 細(xì)胞周期
  • 時間標(biāo)記

摘要:在芽殖酵母中構(gòu)建CDC10-mCherry和SPC42-mCherry熒光蛋白,作為酵母細(xì)胞周期不同時期的報告系統(tǒng)。根據(jù)酵母細(xì)胞中芽環(huán)(CDC10-mCherry)的產(chǎn)生和消失以及紡錘體極體(SPC42-mCherry)的復(fù)制和分離,可以測量細(xì)胞周期中G1期、S期、EarlyM期和LateM期的時間長度。在此報告系統(tǒng)的基礎(chǔ)上,分別構(gòu)建S期細(xì)胞周期蛋白CLB5-GFP和M期細(xì)胞周期蛋白CLB2-GFP菌株,實現(xiàn)單細(xì)胞觀測,檢驗報告系統(tǒng)工作的穩(wěn)定性和準(zhǔn)確性。該報告系統(tǒng)可作為研究酵母細(xì)胞周期不同時期時間長度等定量生物學(xué)問題的背景菌株。

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