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催化發夾組裝用于堿基切除修復酶活性檢測研究

王濤; 湯建新; 李青 湖南工業大學生命科學與化學學院; 湖南株洲412007
  • 催化發夾組裝
  • 堿基切除修復酶
  • 酶活性檢測
  • 無酶信號放大
  • 核酸內切酶iv

摘要:堿基切除修復酶在DNA損傷修復過程中具有重要作用,且其檢測與癌癥等疾病的診斷相關。傳統的堿基切除修復酶檢測方法操作復雜、靈敏度低,且僅對酶的濃度進行定量分析而非酶的活性。為此,建立了基于催化發夾組裝介導信號放大用于核酸內切酶IV(Endo IV)活性的檢測方法。該方法利用Endo IV的活性作用于底物探針,將引發序列釋放而引發催化發夾自組裝信號放大,以實現Endo IV的活性檢測分析。通過熒光檢測實驗可知,該方法檢測下限為3.7×10-7 U/mL,可選擇性地對Endo IV的活性進行檢測,是一種設計簡單、操作簡便、靈敏度高的堿基切除修復酶活性檢測方法。

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