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AChE在小鼠皮膚切創愈合過程中的時序性表達及分布

趙建新; 金馨; 黃俊杰; 姚藝; 喻林升; 范琰琰 溫州醫科大學法醫學系; 浙江溫州325035; 溫州醫科大學司法鑒定中心; 浙江溫州325035; 溫州醫科大學司法鑒定科學技術研究所; 浙江溫州325035
  • 法醫病理學
  • 乙酰膽堿酯酶
  • 傷口愈合
  • 免疫組織化學染色
  • 免疫熒光技術

摘要:目的檢測乙酰膽堿酯酶(acetylcholinesterase,AChE)在小鼠皮膚切創愈合過程中的時序性表達及分布特征,探討其在創口愈合中的作用及其作為創口形成時間推斷參考指標的可行性。方法45只C57BL/KsJ小鼠被隨機分為1個對照組和8個切創組。切創組建立皮膚切創模型,分別于傷后6h、12h、1d、3d、5d、7d、10d、14d提取皮膚創口樣本;對照組提取未切創的皮膚組織。應用免疫組織化學染色、雙重免疫熒光染色及Western印跡法檢測皮膚樣本中AChE的表達與分布。結果免疫組織化學染色結果顯示,傷后6~12h,AChE主要表達于浸潤的多形核白細胞;傷后1~3d,大量浸潤的單個核細胞呈現AChE陽性染色;傷后5~14d,AChE陽性細胞以成纖維樣細胞為主。AChE的陽性細胞率于傷后6h開始增多,傷后1d達到峰值。雙重免疫熒光染色結果顯示,AChE陽性的單個核細胞和成纖維樣細胞主要為巨噬細胞和肌成纖維細胞。Western印跡法檢測結果顯示,各切創組AChE表達的相對表達水平均高于對照組,于傷后1d達到峰值,此后下降,于傷后7d達到第2個峰值。結論皮膚創口愈合期間AChE時序性表達于多形核白細胞、巨噬細胞和肌成纖維細胞,提示其可能參與創口愈合的炎癥反應和纖維性修復的調節。聯合使用多種方法檢測AChE的表達,可以為創口形成時間的推斷提供參考依據。

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法醫學

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