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特異長(zhǎng)鏈非編碼RNA在肝細(xì)胞癌中的表達(dá)和驗(yàn)證

厲新妍; 方亮; 黃淑琳 廣州市第一人民醫(yī)院; 廣東廣州510180; 香港大學(xué)理學(xué)院; 中國(guó)香港
  • 肝細(xì)胞癌
  • 長(zhǎng)鏈非編碼rna
  • 長(zhǎng)鏈非編碼rna芯片

摘要:目的:分析肝細(xì)胞癌組織與配對(duì)癌旁組織中表達(dá)差異的長(zhǎng)鏈非編碼RNA(lncRNA),探討可能與肝細(xì)胞癌發(fā)生發(fā)展有關(guān)的特異lncRNA。方法:采用lncRNA芯片技術(shù),檢測(cè)5例肝細(xì)胞癌和其配對(duì)癌旁正常組織中的lncRNA和mRNA,篩選出差異表達(dá)的lncRNA和mRNA。運(yùn)用分層聚類分析,GO分析和pathway分析等生物信息學(xué)技術(shù)對(duì)其進(jìn)行分類。最后從中選擇10個(gè)lncRNA用RT-PCR進(jìn)行定量驗(yàn)證。結(jié)果:有1 359個(gè)lncRNA表達(dá)水平出現(xiàn)顯著性差異,差異倍數(shù)〉2倍。629個(gè)顯著上調(diào),占46.2%,其中125個(gè)表達(dá)5倍以上;730個(gè)顯著下調(diào),占53.7%,其中110個(gè)表達(dá)5倍以上。聚類分析結(jié)果:(1)基因間lncRNA有11 706條,其中與已知編碼基因相距〈300 kb的lncRNA共有352條。(2)增強(qiáng)子型lncRNA共有1 802條,其中與已知編碼基因相距〈300 kb的lncRNA共有42條。(3)HOX基因簇共有101條。GO分析將mRNA分成分子功能、生物過(guò)程和細(xì)胞組分3類。Pathway分析結(jié)果:差異表達(dá)的mRNA基因所參與的細(xì)胞生命活動(dòng)調(diào)控通路共有61條,上調(diào)表達(dá)的mRNA參與12條通路,下調(diào)表達(dá)的mRNA參與49條通路。參與細(xì)胞周期和化學(xué)致癌作用的表達(dá)水平明顯改變。RT-PCR結(jié)果:8條lncRNA表達(dá)趨勢(shì)與基因芯片結(jié)果一致。對(duì)癌組和癌旁組進(jìn)行檢驗(yàn),有6條有顯著性差異(P〈0.05)。結(jié)論:與癌旁組織比較,lncRNA肝細(xì)胞癌組織中的表達(dá)水平明顯改變,可能與肝細(xì)胞癌的發(fā)生發(fā)展有關(guān)。

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