結縷草熱激蛋白基因ZjHSP19.5植物表達載體構建及轉化
張雅晰; 李鑫; 屈新月; 唐志菲; 魏佳興; 馮英偉; 孫鑫博 河北農業大學河北省作物生長調控重點實驗室; 河北保定071000
- 結縷草
- 熱激蛋白
- 表達載體
- 匍匐翦股穎
摘要：以結縷草(Zoysia japonica Steud)cDNA為模板,利用PCR擴增ZjHSP19.5基因,并插入到PGEM-T Easy Vector上構建成克隆載體ZjHSP19.5-T。利用限制性內切酶BamHI分別對克隆載體ZjHSP19.5-T和植物表達載體PZH01進行單酶切,得到目的基因和線性質粒。在T4DNA連接酶的作用下將兩者進行定向連接,經瓊脂糖凝膠電泳檢測、酶切鑒定,獲得植物表達載體P-ZjHSP19.5。利用農桿菌介導法將重組植物表達載體P-ZjHSP19.5轉化至匍匐翦股穎,為進一步研究ZjHSP19.5的功能和培育匍匐翦股穎抗熱新品系打下基礎。
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