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基于代謝工程與生物正交反應(yīng)的病毒原位標(biāo)記技術(shù)研究

王芳芳; 潘宏; 何華美; 馬軼凡; 蔡林濤 中國(guó)科學(xué)院深圳先進(jìn)技術(shù)研究院; 深圳518055; 中國(guó)科學(xué)院大學(xué); 北京100049
  • 原位生物正交
  • 代謝工程
  • 疊氮基團(tuán)
  • 囊膜病毒
  • 非囊膜病毒

摘要:示蹤病毒在細(xì)胞內(nèi)的感染路徑對(duì)探究病毒的感染機(jī)制具有重要意義,病毒標(biāo)記是實(shí)現(xiàn)病毒示蹤的關(guān)鍵。針對(duì)目前病毒標(biāo)記方法中存在的不足,該文提出了一種基于代謝工程的病毒原位生物正交標(biāo)記技術(shù)。脂質(zhì)/氨基酸/單糖的疊氮衍生物經(jīng)細(xì)胞代謝將疊氮基團(tuán)修飾在病毒表面,被修飾病毒粒子識(shí)別結(jié)合宿主細(xì)胞后與攜帶二苯基環(huán)辛炔(DBCO)的熒光探針經(jīng)生物正交反應(yīng)連接從而實(shí)現(xiàn)病毒標(biāo)記。結(jié)果顯示,疊氮基團(tuán)在囊膜病毒和非囊膜病毒表面都有很好的修飾效果,并且在原位生物正交中攜帶二苯基環(huán)辛炔基團(tuán)的熒光探針可快速捕捉到疊氮修飾的病毒粒子實(shí)現(xiàn)病毒標(biāo)記。該標(biāo)記方法不僅操作簡(jiǎn)單,而且適用于囊膜病毒與非囊膜病毒的標(biāo)記。

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