摘要:[目的]建立2種早實(shí)核桃高效和穩(wěn)定的體胚發(fā)生體系,為離體快繁技術(shù)及其基礎(chǔ)研究提供技術(shù)和理論支撐,也為核桃遺傳轉(zhuǎn)化體系的構(gòu)建奠定基礎(chǔ)。[方法]分別以實(shí)生核桃‘林早香’和嫁接核桃‘中林6號(hào)’花后4277d的幼胚為試材進(jìn)行離體培養(yǎng),通過統(tǒng)計(jì)體胚誘導(dǎo)率,篩選體胚的最佳誘導(dǎo)時(shí)期;統(tǒng)計(jì)多次繼代的體胚畸變率,并篩選最適ABA調(diào)節(jié)濃度;選取發(fā)育成熟的體胚進(jìn)行飽和NH4NO3溶液脫水處理,分別處理0、24、48、72、96和120h后統(tǒng)計(jì)失水量和轉(zhuǎn)株率,探討脫水程度對(duì)體胚植株再生的影響。[結(jié)果]外植體的發(fā)育時(shí)期對(duì)體胚發(fā)生至關(guān)重要,以‘林早香’和‘中林6號(hào)’幼胚為外植體進(jìn)行體胚誘導(dǎo),最佳誘導(dǎo)時(shí)期分別為花后約49d和56d,體胚誘導(dǎo)率分別為88.32%和86.67%。體胚經(jīng)多次繼代培養(yǎng)后產(chǎn)生較高畸變率,適量ABA處理不僅降低體胚畸變率,且提高體胚發(fā)生率,最佳ABA調(diào)節(jié)濃度為1.0mg·L^-1。隨著體胚脫水時(shí)間的延長,體胚失水量逐漸增加,植株再生率先升高后降低,脫水72h時(shí),‘林早香’和‘中林6號(hào)’的體胚萌發(fā)率達(dá)到最高,分別為56.67%和53.33%,此時(shí)失水量分別為38.73%和40.56%。[結(jié)論]早實(shí)核桃幼果發(fā)育過程中,合子胚的體胚發(fā)生率隨著發(fā)育時(shí)期變化,適宜發(fā)育時(shí)期是提高體胚誘導(dǎo)發(fā)生的關(guān)鍵;適量ABA在體胚多次繼代培養(yǎng)過程中對(duì)畸形胚起重要調(diào)節(jié)作用;適度的脫水處理對(duì)核桃體胚再生具有良好的促進(jìn)作用。
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