摘要:【目的】提高棉花在低磷脅迫下的抗性,挖掘棉花磷脅迫相關(guān)功能基因。【方法】用生物信息學(xué)方法分析Gh WRKY6基因的結(jié)構(gòu)特征和進(jìn)化關(guān)系;構(gòu)建基因超表達(dá)載體轉(zhuǎn)化擬南芥,分析轉(zhuǎn)基因擬南芥在低磷脅迫下的抗性;利用熒光定量PCR(Real-time quantitative polymerase chain reaction, qRT-PCR)分析擬南芥中磷信號(hào)途徑Marker基因表達(dá)量的變化。【結(jié)果】以陸地棉cDNA為模板克隆得到Gh WRKY6基因,生物信息學(xué)分析表明該基因序列含有一個(gè)WRKY保守結(jié)構(gòu)域,是WRKY家族轉(zhuǎn)錄因子。在低磷脅迫下,轉(zhuǎn)基因擬南芥與野生型相比,種子萌發(fā)速度、主根長(zhǎng)度、側(cè)根數(shù)目、生物量均低于野生型,而在正常生長(zhǎng)條件下兩者并無(wú)差別。qRT-PCR分析表明GhWRKY6能夠影響關(guān)鍵的磷轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因的表達(dá)。【結(jié)論】GhWRKY6作為一個(gè)負(fù)調(diào)控因子參與到植物低磷脅迫響應(yīng)信號(hào)途徑中。
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