摘要：【目的】為使抗松材線蟲病馬尾松(Pinus massoniana Lamb.)快速大規(guī)模繁殖,對抗性馬尾松體細(xì)胞胚胎發(fā)生和植株再生條件進(jìn)行優(yōu)化。【方法】以抗病馬尾松未成熟合子胚為材料,探討胚性愈傷組織的誘導(dǎo)、增殖與維持、分化成熟以及萌發(fā)的合適培養(yǎng)條件,并對體細(xì)胞胚進(jìn)行生根誘導(dǎo),對再生植株進(jìn)行壯苗培養(yǎng)以及馴化移栽。【結(jié)果】以LP為基本培養(yǎng)基,添加2.0 mg/L 2,4-D(二氯苯氧乙酸)和1.0 mg/L 6-BA(6-芐氨基腺嘌呤),抗性馬尾松胚性愈傷組織誘導(dǎo)率最高達(dá)27.8%。在胚性愈傷組織增殖維持過程中,懸浮培養(yǎng)中的增殖系數(shù)和同步化程度都顯著高于固體培養(yǎng),且經(jīng)過懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞系分化能力更強(qiáng)。萌發(fā)過程中只有少量能順利分化出根系,未能順利分化出根的體胚于添加適量IBA和NAA的生根培養(yǎng)基中能夠更好地生根。壯苗培養(yǎng)過程中,添加0.01 mg/L油菜素內(nèi)酯有助于體胚苗的生長。體胚苗在馴化移栽時不同大小的苗移栽成活率相差較大,5 cm左右的體胚苗成活率最高達(dá)90.3%。【結(jié)論】生長素2,4-D和6-BA組合(2.0 mg/L和1.0 mg/L)對抗性馬尾松胚性愈傷組織誘導(dǎo)率較好;懸浮培養(yǎng)后的細(xì)胞系更利于誘導(dǎo)體胚,適宜濃度的IBA和NAA(1.0 mg/L和0.2 mg/L)能夠促進(jìn)體胚苗根系生長。在壯苗培養(yǎng)基中添加適量油菜素內(nèi)酯能夠促進(jìn)抗性馬尾松再生植株的生長,待苗長至5 cm左右移栽較好。