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小麥TaXTH-7A基因的克隆及抗旱性鑒定

周琪; 馮燕茹; 李嵩; 劉子輝; 鄭煒君; 柴守誠(chéng) 西北農(nóng)林科技大學(xué)農(nóng)學(xué)院; 楊凌712100
  • 小麥
  • 表達(dá)分析
  • 亞細(xì)胞定位
  • 抗旱

摘要:小麥(Triticum aestivum)是我國(guó)重要的糧食作物之一,然而干旱等逆境嚴(yán)重影響了小麥的品質(zhì)和產(chǎn)量。篩選抗逆基因,解析其作用機(jī)理,可以為小麥抗逆分子育種提供候選基因和理論依據(jù)。木葡聚糖內(nèi)糖基轉(zhuǎn)移酶/水解酶(xyloglucan endotransglucosylase/hydrolase, XET/XEH)統(tǒng)稱為XTH,屬于糖苷水解酶16 (glycoside hydrolase 16, GH16)家族,參與細(xì)胞壁的形成與重構(gòu),在植物生長(zhǎng)發(fā)育和抗逆境中發(fā)揮重要作用。本研究克隆得到小麥木葡聚糖內(nèi)轉(zhuǎn)糖苷酶基因TaXTH-7A (GenBank No. MK395550),發(fā)現(xiàn)其包含3個(gè)外顯子和2個(gè)內(nèi)含子,CDS區(qū)全長(zhǎng)870 bp,編碼290個(gè)氨基酸。蛋白序列含有XET特有的結(jié)構(gòu)域,且在不同物種間高度保守。系統(tǒng)進(jìn)化樹分析表明,XTH-7A蛋白在單子葉與雙子葉之間、C3與C4植物之間均發(fā)生演化,與節(jié)節(jié)麥親緣關(guān)系最近。qRT-PCR結(jié)果顯示,TaXTH-7A基因在抽穗期小麥的根、莖、葉和穗中均有表達(dá),在根中優(yōu)勢(shì)表達(dá);干旱脅迫后其表達(dá)量在4 h達(dá)到峰值。亞細(xì)胞定位結(jié)果顯示TaXTH-7A蛋白定位在細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞膜以及質(zhì)外體。功能鑒定表明過表達(dá)TaXTH-7A提高了轉(zhuǎn)基因擬南芥(Arabidopsis thaliana)的抗旱性。本研究有助于進(jìn)一步研究小麥TaXTH-7A基因的功能,也為小麥抵抗非生物脅迫提供了理論依據(jù)。

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