摘要：上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)是上皮細胞來源的惡性腫瘤細胞獲得遷移和侵襲能力的重要生物學過程。為了探究Krüppel樣因子5(Krüppel-like factor 5,KLF5)調(diào)控宮頸癌細胞發(fā)生EMT過程的分子機制,首先在宮頸癌HeLa細胞瞬時轉(zhuǎn)染Flag-KLF5質(zhì)粒進行KLF5過表達,并通過MTT法、細胞劃痕和Transwell實驗證實,KLF5可以顯著地抑制HeLa細胞的侵襲和遷移能力。然后采用Western-blot和實時定量PCR技術(shù)檢測HeLa細胞中EMT相關基因的表達水平,結(jié)果顯示E-cadherin表達升高,N-cadherin和MMP9表達降低;而且,E-cadherin基因的上游調(diào)控因子如SNAI1、SLUG、ZEB1/2和TWIST1等的mRNA表達下降。進一步開展對比研究,在SiHa細胞中用siRNA沉默KLF5基因,再次驗證了KLF5對EMT相關基因表達水平的影響。隨后構(gòu)建不同長度的SNAI1啟動子截短體,用熒光素酶報告基因?qū)嶒灆z測KLF5對SNAI1啟動子活性的影響,結(jié)果顯示KLF5可以抑制SNAI1啟動子區(qū)域的活性,并且在HeLa細胞中過表達SNAI1基因后,可顯著地促進細胞的EMT過程。以上結(jié)果表明,KLF5可通過調(diào)控SNAI1基因的表達來調(diào)節(jié)宮頸癌細胞的EMT過程,進而抑制宮頸癌細胞的遷移和侵襲能力。