肉葡萄球菌電轉化條件的優化
張變強; 唐巧巧; 柯靈超; 張健; 王德培; 朱燕; 高強 工業發酵微生物教育部重點實驗室; 天津科技大學生物工程學院; 天津300457; 天津科技大學后勤管理處; 天津300457
- 肉葡萄球菌
- 電轉化
- 轉化效率
摘要：肉葡萄球菌(Staphylococcus carnosus)作為革蘭氏陽性菌,遺傳轉化難度大是限制其遺傳操作的主要因素之一.通過優化菌體生長狀態、電擊緩沖液、復蘇培養基組分等條件,分析了各因素對S.carnosusTM300電轉化效率的影響.研究表明:S.carnosusTM300在B2生長培養基中生長到A578=0.6時收集菌體,使用GS電擊緩沖液洗滌菌體制備感受態細胞,在電壓2450V、間距2mm電轉杯條件下進行電轉化,電擊后立即加入LBM復蘇培養基,37℃、180r/min搖床復蘇培養4h,可以獲得的最佳電轉化效率為5.95×10^3μg^-1.
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