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兩種聚合酶在等位基因特異性引物延伸法檢測SNP中的應用比較

陳載鑫; 何丹; 謝嶺平; 李柳燕; 許紅麗; 方佩榮; 尹沃河; 付文金 廣東醫科大學附屬東莞市厚街醫院檢驗科; 廣東東莞523900; 武崗市人民醫院; 湖南武崗422400
  • 聚合酶
  • 基因多態性
  • snp
  • 等位基因特異性引物延伸法

摘要:目的比較TaqTMHotStarDNA聚合酶和TspTMPlatinum DNA聚合酶在等位基因特異性引物延伸法檢測SNP中的應用效果。方法取120例抗血栓治療患者全血進行DNA提取、多重PCR擴增,將產物分2份,1份用TaqTMHotStarDNA聚合酶進行等位基因特異性引物延伸,1份用TspTMPlatinum DNA聚合酶進行等位基因特異性引物延伸,然后進行雜交反應,用Luminex 200系統檢測CYP2C19基因多態性,同時將所有樣本送第三方進行基因測序。結果TaqTMHotStarDNA聚合酶組檢測結果與測序結果完全一致,TspTMPlatinum DNA聚合酶則會出現一些偏差,說明TaqTMHotStarDNA聚合酶參與的檢測結果分辨率明顯高于TspTMPlatinum DNA聚合酶參與的檢測結果。結論兩種聚合酶在等位基因特異性引物延伸法檢測SNP中均可以取得一定的檢測結果,但是為了結果的可靠性建議在檢測過程中使用TaqTMHotStarDNA聚合酶。

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