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鴨抗病毒蛋白(viperin)在轉染的BHK-21細胞表達并抑制鴨坦布蘇病毒出芽

周祺; 顧香雪; 許澤軍; 黃榮; 殷冬冬; 薩達婭; 呂炫; 王桂軍 安徽農業大學動物科技學院; 獸醫病理生物學與疫病防控安徽省重點實驗室; 安徽合肥230036
  • viperin蛋白
  • 質譜分析法

摘要:目的探索鴨抗病毒白(viperin)對鴨坦布蘇病毒(DTMUV)增殖的影響。方法使用生物學信息學方法分析鴨viperin基因,構建系統發育樹。構建原核表達質粒pGEX-6P-viperin和真核表達質粒pEGFP-N1-viperin,分別轉化Rosseta感受態細胞和轉染BHK-21細胞。用DTMUV分別感染真核表達質粒和空載體質粒的BHK-21細胞,利用實時熒光定量PCR檢測細胞沉淀和上清中DTMUV的含量,利用質譜的方法鑒定增強型綠色熒光蛋白(EGFP)單克隆抗體捕獲的結合蛋白。結果鴨viperin基因與其他種屬viperin基因有顯著差異。鴨viperin蛋白能成功在BHK-21細胞表達,鴨viperin抑制DTMUV在BHK-21細胞中的出芽。質譜分析結果顯示轉染真核表達質粒的細胞中可能存在6種影響抑制DTMUV增殖、出芽的蛋白。結論鴨viperin蛋白可在BHK-21細胞表達,且能抑制鴨坦布蘇病毒出芽。

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細胞與分子免疫學

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