摘要：[目的]CRISPR/Cas9 基因編輯技術是作物遺傳改良的有效工具。本研究通過對水稻Pita、Pi21和ERF922稻瘟病相關基因進行定點編輯,以期獲得能夠穩定遺傳的抗稻瘟病水稻材料。[方法]利用 CRISPR/Cas9基因編輯技術,以 Pita、Pi21 和 ERF922 為靶基因,構建共編輯載體 pC1300-2×35S::Cas9-g^Pita-g^Pi21-g^ERF922 ,用農桿菌轉化長粒粳稻恢復系L1014,篩選獲得穩定遺傳的純合突變體用于稻瘟病抗性鑒定。[結果]在T0代轉基因株系中,Pita、Pi21和ERF922 突變頻率分別為 75%、85%和 65%,突變基因型多為雙等位突變。篩選到的不含 T-DNA成分的T1代能夠穩定遺傳給T2代,并從中獲得 Pi21單突變純合株系及Pita、Pi21和ERF922的三突變純合株系。稻瘟病抗性鑒定結果表明,與野生型相比,突變株系的抗性顯著提高。同時,接種后純合突變體株系內水楊酸、茉莉酸和乙烯等信號轉導途徑相關基因的表達量均上調。據此,我們推測純合突變株系對稻瘟病的抗性增強可能與其對稻瘟病菌的響應被激活有關。[結論]利用 CRISPR/Cas9 技術獲得了能夠穩定遺傳和具有較高稻瘟病抗性的純合突變株系,為水稻稻瘟病抗性改良提供了良好的材料。